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論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
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論如何處理Waters色譜耗材的污染問題
Waters色譜耗材的柱效是Waters色譜耗材在色譜分離過程中主要由熱力學(xué)因素所決定的分離效能。通常用理論塔板數(shù)表示。柱效是衡量Waters色譜耗材性能的一項(xiàng)主要指標(biāo)，柱效越高，分離能力越強(qiáng)。
柱效測(cè)試方法可以根據(jù)每根Waters色譜耗材附帶的測(cè)試報(bào)告提供的方法條件進(jìn)行試驗(yàn)。通常實(shí)際測(cè)試結(jié)果比Waters色譜耗材所附的測(cè)試報(bào)告結(jié)果偏低是正常的。因?yàn)閮x器公司測(cè)試塔板數(shù)的HPLC系統(tǒng)是專門設(shè)計(jì)的，整個(gè)系統(tǒng)擴(kuò)散體積非常小。
如果新柱測(cè)試結(jié)果與報(bào)告中有很大不同，很大可能是由于色譜系統(tǒng)配置以及死體積等因素的影響。需要考慮不同柱外體積的影響：
柱外體積是指“額外”或“外部”（相對(duì)于Waters色譜耗材）體積，是系統(tǒng)的一部分，尤其是各LC部件、Waters色譜耗材之間的連接管線體積、進(jìn)樣體積和流通池體積。
對(duì)于各部件的連接管線，為了減少體積可以使用更小內(nèi)徑的管線。
下面的例子就顯示了柱外體積的影響。當(dāng)使用較小的柱子時(shí)，10ml的柱外體積可以得到良好的分離結(jié)果，當(dāng)加上一段管線形成50mL的柱外體積，色譜峰變寬、分離度降低。在向系統(tǒng)中添加體積不明的管線時(shí)，這種情況經(jīng)常發(fā)生。添加一段太長(zhǎng)的管線，或內(nèi)徑較大的短管時(shí)，會(huì)使柱效Waters色譜耗材的分離度變差。
不同內(nèi)徑的管線對(duì)色譜峰展寬的影響。管線內(nèi)徑越大，樣品譜帶在管線內(nèi)發(fā)生的擴(kuò)散也就越da，色譜峰展寬也就越嚴(yán)重。當(dāng)然，內(nèi)徑越大，同等長(zhǎng)度的管線帶進(jìn)去的柱外體積也越大。
原則上，系統(tǒng)的大柱外體積（管線體積、進(jìn)樣體積和檢測(cè)器體積）不應(yīng)超過柱體積的10%。
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